大ヒットアニメ『怪盗グルーの月泥棒』の続編。裏稼業から足を洗ったグルーが、誘拐されたミニオン救出のため新相棒と奮闘する！
大ヒットしたアニメ『怪盗グルーの月泥棒』のシリーズ第２弾。今回は怪盗グルーが何者かに誘拐されたミニオンたちを助け出すため、新たな相棒と共に大冒険を繰り広げる姿を描く。シリーズの人気キャラクター“ミニオン”は、バナナが大好物な黄色い謎の生物。いたずら好きで好奇心旺盛な彼らの個性溢れるキャラは前作で人気爆発。本作ではメインキャラとして大活躍し、登場シーンも大幅増！大人も子供も楽しめるハッピーなアニメ。

月を盗んで世界一の怪盗の名声を手に入れたグルー。引き取った三姉妹の父親となり悪党稼業から足を洗った彼は、バナナが大好物の黄色い軍団ミニオンたちに囲まれ、マイホームパパを目指して努力中。ある日、北極圏の極秘研究所から突然変異を起こす薬“ＰＸ４０”が盗まれ、“反悪人同盟”に強引にスカウトされたグルーは、相棒の美人捜査官ルーシーと共に捜査することに。そんな折、ミニオンたちが何者かにさらわれてしまい…。